Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中渐渐扩展

从第一次消失口内自身HIV到消失1标准型哮喘诊断症状的实质性率在儿童时期就有很好的所述，多个口内自身HIV感染性的儿童中所有70%在血清转换后10年内患上哮喘，而随访15年的儿童这一人口比例减少到84%。相比较之下，占诊断1标准型哮喘一半以上的标准型1标准型哮喘的胃癌有助于还并未得到充分的深入研究。

越来越多的人开始用于分期系统来假定1标准型哮喘的实质性：有机体在消失多种口内自身HIV时进入第1阶段，消失血糖诱发时进入第2阶段，消失症状时进入第3阶段。一些多发口内自身HIV感染性的有机体，在1期和2期，实质性速度快，并发展为胃癌的1标准型哮喘。我们之前所述了一第三组在首次检测到多种口内自身HIV取样后多于10年无哮喘的极慢实质性者，这第三组病患者多人少，但不同之处并不明确。随后，我们发现口内自身蛋白特异性CD8+T细胞核质弟化在实质性快速的病患者中所基本不依赖于，但在近期胃癌和肇因的哮喘病患者中所很容易检测到。这确实表明，与实质性病患者相比较，这些病患者血栓质弟化的调节提升。

以前深入研究表明，尽管调节性T细胞核(Treg)数量正常，但哮喘病患者依赖于一些特性不足之处，其中所有数对IL-2的质弟化能力减少。此外，哮喘病患者中所的物理现象CD4+T细胞核确实对调节更加具抵抗性，展示出为物理现象T细胞核的可抑制弱化，自然地造成了的Treg和体外造成了的诱导Treg，以及蛋白经历的CD4+T细胞核中所IL-2质弟化弱化。本深入研究的目的是所述了CD4+调节性T细胞核(Treg)在一小群极快速实质性者中所的不同之处，他们的平均成年人为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

工具：BOX深入研究是一项以人群为基础的横向深入研究，在21岁以下肺炎的病患者亲属中所检查1标准型哮喘的可怕环境因素。我们之前所述了长时间快速实质性者的不同之处，他们保持良好多重口内自身HIV感染性超过10年，但并未消失哮喘的诊断症状，慢性或非神经性血栓。随后，10名暂时保持良好无哮喘并愿意提供大量血液取样的快速实质性者纳入T和B细胞核特性分析。在目前的深入研究中所，8名慢实质性者(SP第三组)，中所位成年人43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的口内自身HIV感染性。所有的自发性都正处于1标准型哮喘实质性的1期，尽管一些人随后耗尽了口内自身HIV对某些蛋白的感染性质弟化，然而，一名病患者仍然正处于2期多于6年，但并未消失诊断症状，一名病患者被检验为哮喘，该受试者72岁，在挖掘出试验取样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据分析中所对该NADPH进行了单独评估。受控外周血单个核细胞核(PBMCs)，运用于多数值流式细胞核精和T细胞核可抑制试验性评估NADPH中所Treg的频谱、表标准型和特性。用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和回归)进行无委派聚类分析，评估Treg表标准型。

结果：与身体健康NADPH相比较，来自慢实质性体的心灵CD4+T细胞核的委派聚类辨识，转录的心灵CD4+ Treg频谱减少，与糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白(GITR)传达减少有关。一名HbA1c升高的病患者与实质性快速者和也就是说的对照第三组相比较，Treg谱大同小异。特性推断，与身体健康NADPH相比较，来自快速实质性体的Treg介导的CD4+物理现象T细胞核可抑制相对来说受损。展示出为对物理现象CD4+T细胞核CD25和CD134传达的可抑制减少。

绘出1 深入的表标准型分析辨识，CD4+Treg亚标准型在慢实质性队列中所减少。由FlowSOM转换成的Treg四楼，聚集在来自所有NADPH的活CD4+CD45RA -细胞核上。根据标有物传达鉴定出10个元簇:心灵T细胞核_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;心灵T cell_4;CD49b心灵T细胞核;HLA-DR + GITR +心灵T细胞核;缓存Treg_1;缓存Treg_2;缓存Treg_3;和缓存Treg_4。(a)用于9个不尽相同Treg标有转换成的10个元簇的MST。每个终端代表一个集群(100个集群)，更加大的元集群(10个元集群)在终端第三组区域内上色。每个终端中所的粥绘出指出单个标有的传达级别。(b)每个元聚类的热绘出，以辨识整体标有传达。(c, d)为HD第三组(c)和SP第三组(d)转换成绘出，以及FlowSOM辨别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相比较较轻元素为每个metacluster盒示意绘出(轻元素> 0.05%)已确定为HD和SP第三组:缓存Treg_2 (e),缓存Treg_3 (f),缓存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +心灵T细胞核(h)、心灵T cell_1(i),心灵T cell_2 (j),心灵T cell_3 (k) n d CD49b心灵T细胞核(l)。粉红色圆圈代表理应SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于绘出形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

绘出2 用于CITRUS的预测模标准型断定，Treg频谱的减少是实质性快速的标志。分级依赖型(a - f)和葡萄分析(g-k)比较SP自发性和也就是说的HD自发性在CD4+CD45RA−T细胞核上的关联。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l个体的代表性绘出。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR传达进行受控，建模FlowSOM个体。(b) HD(外缘)和SP(布氏)第三组以及NADPHSP 606(粉红色)中所CD25+ cd127的频谱概述绘出。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+依赖型弟集的盒示意绘出;(c) HLA-DRloGITR−(缓存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(缓存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(缓存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+缓存T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3传达切变制做，箭头突出的簇被辨别为SP和HD队列之间的不尽相同。(j)盒示意绘出辨识了在SP(布氏)和HD(灰点)第三组中所，CITRUS心灵Treg_3和Treg_4的相比较较轻元素(人口比例)。(k)直方绘出辨识每个簇的表标准型(粉红色)和Treg标有相比较较传达与历史背景传达(金色);上列，缓存Treg_3;请注意一行，缓存Treg_4。历史背景与所有其他簇中所标有的传达有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

绘出3 与身体健康献血者相比较，实质性快速者心灵treg的GITR减少。每个心灵CD4+T细胞核元簇(心灵T细胞核_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;CD49b +心灵T细胞核;HLA-DR + GITR +心灵T细胞核;缓存Treg_2;缓存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检测每个传达标有的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的传达热绘出(sp606不有数在内)。(c,d)心灵Treg_4元簇中所所有HD(灰色)、所有SP(金色)和SP 606(粉红色)的FlowSOM GITR传达串联，辨识直方绘出(c)和概述绘出(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(粉红色)所有NADPH有数，p< 0.05(金色)NADPHSP 606和也就是说的HD不有数在测试中所。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中所GITR传达，从分级依赖型，从所有HD(灰色)、所有SP(金色)和SP 606(粉红色)串联，辨识直方绘出(e)和概述绘出(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

绘出4 来自快速实质性的CD4+ treg细胞核掌控物理现象CD4+T细胞核的能力减少。SP第三组用金色的本站和圆圈指出，HD第三组用红色的本站和圆圈指出，粉红色的本站/圆圈指出NADPHsp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞核进行分选。CD4+CD25−(应答者)被标有为CFSE, Treg按观察的人口比例滴定。用抗CD3 /28微珠活化细胞核，养成3天后进行流式细胞核精检测。(a-d)与CD4+应答者相比较较应的treg养成(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD应答者养成。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE可抑制多于(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制多于。用于感染性对照(转录的响应细胞核不含treg)计数可抑制多于。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

绘出5 物理现象CD4+T细胞核对快速实质性的T细胞核活化的可抑制更加尖锐。SP第三组用金色的本站和圆圈指出，HD第三组用红色的本站和圆圈指出，粉红色的本站/圆圈指出NADPHsp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞核进行分选。CD4+CD25−(应答者)被cfsel标有，treg按观察的人口比例滴定。用抗CD3 /28微珠活化细胞核，养成3天后进行流式细胞核精(CD25反染)和细胞核因弟分析。HD Treg与HD、SP或sp606应答者共同养成。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE可抑制次之(b)。(c,d) CD25可抑制次之(c)和CD134可抑制次之(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共养成中所的传达。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论断：我们得出的论断是，来自快速实质性弟的活化心灵CD4+Treg在GITR传达中所得到了扩展和丰富，强调了有利于深入研究Treg在1标准型哮喘风险有机体中所的关联性的必要性。

文中出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28